分析其抑菌率和抑菌毒力

甜瓜是食品新疆的主要经济支柱产业，但是添加甜瓜采收季节正值高温，再加上果实含有较大的剂对水分，糖含量高，采后生理代谢旺盛，病原在贮藏和运输期间容易受病原菌的真菌作用浸染而发生果实腐烂变质，造成大量经济损失。抑制研究采后果实腐烂的食品主要病害是由Fusarium.sp引起的白霉病和Alternariaalternata引起的黑斑病，目前仍因化学杀菌剂操作方便、添加甜瓜使用简单、剂对见效快被高效普遍利用，采后但是病原长时间施药混乱、大量重复不合理使用不仅会使病菌产生耐药性，真菌作用而且人体健康和环境存在潜在的抑制研究威胁甚至致癌、致畸，食品因此，寻求高效、低毒、无公害的抑菌剂代替或减少化学农药是急需解决的问题。

食品添加剂是食品中的重要部分，具有抗菌性强、低毒（无毒）对环境友好、不易产生抗药性等诸多优点，在食品加工中起到了举重无轻的作用，对提高食品的质量和贮运过程中微生物繁殖引起的腐败变质起到双重作用。农业部提出的到2020年化学药剂使用量“零增长”计划和国家重点研发计划“化学肥料和农药减施增效综合技术研发”专项，既符合人们对绿色健康食品的需求，而且为未来农业可持续发展提供了保障，给无毒、无害的防腐剂带来了良好的发展机遇。本文以农药杀菌剂亿度勇为对照，测定纳他霉素、脱氢醋酸钠、次氯酸钙对甜瓜采后病原真菌菌丝生长繁殖的抑菌圈大小，分析其抑菌率和抑菌毒力，从而为甜瓜采后病害控制提供科学理论依据。

一、材料与方法

1、试验材料

（1）供试药剂

脱氢醋酸钠（有效成分99%，山东西亚化学股份有限公司）、次氯酸钙（漂白粉，有效成分65%～75%，SangonBiotech）、纳他霉素（有效成分95%，Sigma）、亿度勇（总有效成分53%，喹啉铜35%，噻菌灵18%，可湿性粉剂，台湾光华化学股份有限公司）。

（2）供试菌株

镰刀菌、链格孢2种供试菌株由新疆维吾尔自治区葡萄瓜果研究所甜瓜贮藏与运输课题自行分离获得。按照常规方法保存于马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基（广东环凯微生物科技有限公司）斜面试管中于4℃冰箱保存备用。

2、试验方法

（1）菌饼的制备

取灭菌的培养皿，每皿倒入15mL经121℃高温高压灭菌20min的PDA培养基制成平板。

用接种针挑取供试菌株单个孢子接种到PDA平板中央，置于28℃恒温培养箱中培养，待菌落布满平板后，用灭菌的打孔器直径（10mm）在菌落上打取菌饼用于生物测定。

（2）抑菌作用的测定

采用菌丝生长速率法，将3种食品添加剂用无菌水溶解后添加至熔化后冷却至约55℃的PDA培养基中，充分摇匀，倒入无菌培养皿中制成含药平板（每皿约15mL），终浓度如下表。测定脱氢醋酸钠、纳他霉素、次氯酸钙对供试病原真菌的抑制作用。

用接种针挑取菌饼（10mm）接种于含有不同终浓度的食品添加剂的PDA平板中央，不含防腐剂的PDA平板为阴性对照，含有亿度勇的作为阳性对照，每个处理重复3次，每皿一块菌饼，菌丝面朝下。将接种后的培养皿用保鲜袋密封保湿，然后放入28℃的恒温培养箱中培养，3d后用十字交叉法测定各培养皿中菌落直径，计算菌落纯生长量及抑制率，计算公式如下：

菌落纯生长量=菌落直径—菌饼直径（10mm）

抑菌率（%）=（对照菌落纯生长量—处理菌落纯生长量）/对照菌落纯生长量×100%

（3）数据统计分析

采用spss17.0进行数据处理分析，利用Probit回归模型以各食品添加剂浓度的对数值为横坐标（X），菌丝生长抑制率对应的几率值为纵坐标（Y），作线性回归分析，得出不同食品添加剂对甜瓜采后病害的抑制中浓度EC₅₀值和相关系数R²。

二、结果与分析

1、那他霉素对甜瓜采后病害病菌的抑制效果由图1可知，那他霉素对甜瓜采后病原真菌镰刀菌、链格孢的生长抑制作用都较为明显，随着浓度的增加其作用效果增强。浓度为50µg/mL时，对镰刀菌的抑制率为77.27%，对链格孢的抑制率为58.18%；200µg/mL时对镰刀菌的抑制率达到100%，但是对链格孢的抑制率能达到78.18%。由此可知，那他霉素对镰刀菌和链格孢都有较好的抑制作用，且对镰刀菌的抑制效果比对链格孢的显著。

2、脱氢醋酸钠对甜瓜采后病害病菌的抑制效果

由图2可知，脱氢醋酸钠对镰刀菌的抑制作用较强，浓度为50µg/mL时就能够完全抑制菌丝的生长；对链格孢的抑制作用稍弱，抑制率达到67.82%，500µg/mL时能够抑制链格孢菌丝的生长率为94.55%，由此说明，脱氢醋酸钠对镰刀菌和链格孢菌丝的生长都有较好的抑制作用。

3、次氯酸钙对甜瓜采后病害病菌的抑制效果

由图3可知，次氯酸钙对甜瓜采后病原菌的抑制作用较弱，当浓度达到200µg/mL时对镰刀菌菌丝生长的抑制率只有41.56%，对链格孢菌丝生长抑制率都在17.27%以下，由此可知，次氯酸钙对镰刀菌和链格孢的菌丝生长抑制效果都不明显，不能起到更好的抑菌作用。

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